Estimasi Volume Insula Pancreatica Tikus dengan Metode Stereologi secara Manual pada Layar Komputer

https://doi.org/10.22146/ijl.v1i4.52992

Yohanes Suhardi(1*)

(1) Universitas Gadjah Mada
(*) Corresponding Author

Abstract


Latar belakang: Estimasi volume insula pancreatica diperlukan untuk mendapatkan gambaran distribusi sel endokrin yang ada di dalamnya. Estimasi yang tidak bias dapat dilakukan dengan metode Cavalieri, namun belum semua laboratorium memiliki perangkat lunak untuk melakukan perhitungan ini.

Tujuan penelitian: Untuk melakukan uji estimasi volume insula pancreatica tikus dengan metode Cavalieri menggunakan  cetakan pengukur titik di plastik dan foto di layar datar komputer.

Metode: Satu ekor tikus Wistar jantan berumur 3 bulan, dikorbankan dengan cara dekapitasi. Pancreas diambil, difiksasi dan disiapkan untuk ditanam dalam blok paraffin. Sampel irisan dibuat dengan prinsip acak sistematis dan diwarnai dengan hematoksilin-eosin. Dengan menggunakan peralatan sederhana yang telah tersedia di laboratorium, estimasi volume dilakukan dengan metode hitung titik sesuai prinsip Cavalieri.

Hasil: Sebanyak 7 irisan dengan jarak antar irisan 400 µm diamati, titik terhitung untuk estimasi volume pancreas 107 dengan luas area yang diwakili oleh satu titik (a/p) 49.382,62 µm2. Volume total pancreas didapatkan sebesar 2,11x109 µm3 (Coefficient of Error (CE) 10%). Pada estimasi volume insula pancreatica didapatkan titik terhitung 7102 dengan a/p 229,57 µm2yang menghasilkan penghitungan fraksi volume insula sebesar 30,8%. Volume insula pancreatica terhitung sebesar 0,65x109 µm3 (CE 7,6 %).

Kesimpulan: Metode yang dilakukan merupakan cara yang mudah dan murah untuk melakukan estimasi volume, namun memiliki keterbatasan karena jarak antar titik tidak dapat disesuaikan dengan mudah.


Keywords


stereologi; estimasi volume; fraksi volume; insula pancreatica; metode Cavalieri

Full Text:

PDF


References

Altunkaynak, M. E., Zuhal A., Deniz U., Omur D., Ozgen V., Bunyami U. 2013. A stereological and ultrastructural approach to fetal and newborn rat pancreas, J. Exp. Clin. Med., 30:147–151. doi: 10.5835/jecm.omu.30.02.012. Boyce, R. W., Karl A. D. P., Lise L., Hans J. G. 2010. Design-based Stereology: Introduction to Basic Concepts and Practical Approaches for Estimation of Cell Number, Toxicologic Pathology, 38:1011–1025. doi: 10.1177/0192623310385140. Golub, V. M., Jonathan B., Xin W., Ramkumar K., Jenessa S., Maunica M. 2015, Neurostereology protocol for unbiased quantification of neuronal injury and neurodegeneration, Frontiers in Aging Neuroscience, 7:1–14. doi: 10.3389/fnagi.2015.00196. Gundersen, H. J. & Osterby, R. 1981. Optimizing sampling efficiency of stereological studies in biology: or ‘do more less well!’. J Microsc. 121(Pt 1): 65-73. Khorsandi, L. dan Nejad-dehbashi, F., 2013. Exendin-4 effects on islet volume and number in mouse pancreas, Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences, 49(4):745–752. Marcos, R., Monteiro, R., Rocha, E., 2012. The use of design-based stereology to evaluate volumes and numbers in the liver: a review with practical guidelines, Journal of Anatomy, 220: 303–317. doi: 10.1111/j.1469-7580.2012.01475.x. Noorafshan, A., Leila H., Saied K., Elham N. 2012. A Simple Stereological Method for Estimatig the Number and the Volume of the Pancreatic Beta Cells, JOP. J Pancreas, 13(4):427–432. Rueden, C. T., Johannes S., Mark C. H., Barry E. D., Allison E. W. 2017. ImageJ2: imageJ for the next generation of scientific image data, BMC Bioinformatics, 18:529-555. Sheerwood, L., 2006. Fundamentals of physiology: a human perspective, 3rd ed. Thomson Higher Education, United States of America. West, M. J., 2013. Getting Started in Stereology, Cold Spring Harb Protoc., 4:287–298. doi: 10.1101/pdb.top071845.



DOI: https://doi.org/10.22146/ijl.v1i4.52992

Article Metrics

Abstract views : 612 | views : 781

Refbacks

  • There are currently no refbacks.


Copyright (c) 2019 Indonesian Journal of Laboratory

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International License.


 

View My Stats