Purifikasi dan Karakterisasi Imunoglobulin Yolk (IgY) terhadap Jembrana dari Telur Ayam sebagai Dasar Pengembangan Imunisasi Pasif

Firdaus Lingga Kusuma; Michael Hariyadi Wibowo; AETH Wahyuni

doi:10.22146/jsv.66613

Purifikasi dan Karakterisasi Imunoglobulin Yolk (IgY) terhadap Jembrana dari Telur Ayam sebagai Dasar Pengembangan Imunisasi Pasif

https://doi.org/10.22146/jsv.66613

Firdaus Lingga Kusuma⁽¹⁾, Michael Hariyadi Wibowo⁽²⁾, AETH Wahyuni^(3*)

(1) PUSVETMA SURABAYA
(2) Universitas Gadjah Mada
(3) Professor of Microbiology, Faculty of Veterinary Medicine, Department of Microbiology
(*) Corresponding Author

Abstract

Abstrak

Penyakit Jembrana adalah penyakit yang menyerang Sapi Bali (Bos javanicus) dengan penularan dan kematian yang tinggi. Penyakit ini disebabkan oleh Jembrana Disease Virus (JDV) dari famili retroviridae. Pengendalian penyakit Jembrana di Indonesia menggunakan vaksin inaktif yang dibuat dari jaringan limfa sapi terinfeksi JDV sehingga produksinya sangat terbatas. Immunisasi pasif menggunakan antibodi terbukti mampu memberikan perlindungan terhadap berbagai infeksi. Ayam merupakan penghasil antibodi immunoglobulin yolk yang sangat baik. Tujuan penelitian ini adalah melakukan purifikasi dan karakterisasi IgY terhadap Jembrana untuk pengembangan imunisasi pasif. Sebanyak 15 ekor ayam white leghorn umur 24 minggu dibagi menjadi 3 kelompok. Kelompok 1 disuntik dengan 1ml vaksin Jembrana, kelompok 2 disuntik dengan seed virus Jembrana, dan kelompok ke 3 adalah kontrol. Penyuntikan antigen Jembrana dilakukan dua kali dengan interval dua minggu. Telur mulai dikoleksi setelah satu minggu penyuntikan antigen pertama sampai minggu ke lima. Uji antibodi Jembrana dilakukan dengan metode Agarose Gel Precipitaion Test (AGPT). Purifikasi IgY dilakukan dengan pengendapan NaCl, sedangkan untuk melihat karakter IgY Jembrana menggunakan SDS PAGE. Pengendapan NaCl mampu menghasilkan IgY dengan mudah dan biaya yang murah. Pengujian AGPT menunjukkan bahwa IgY muncul pada kelompok ayam yang disuntik dengan vaksin Jembrana, dan tidak muncul pada kelompok yang disuntik dengan seed Jembrana. Pengujian SDS PAGE menunjukkan adanya pita protein dengan berat molekul 67 kDa yang merupakan rantai berat, 46 kDa yang merupakan fragmen Fab, dan 24 kDa yang merupakan rantai ringan.

Keywords

Jembrana; Imunoglobulin yolk; Purifikasi; Karakterisasi

Full Text:

PDF

References

Bhanushali JK, Gilbert JM, McDougald LR. 1994. Simple method to purify chicken immunoglobulin G. Poultry science. 73(7):1158–1161. Carlander D. 2002. Avian IgY Antibody In vitro and in vivo. Comprehensive Summaries of Uppsala Dissertations from Faculty of Medicine 119. ACTA Universitatis Uppsala, Center Texas A & M University Kingsville. Coffman RL, Sher A, Seder RA. 2010. Vaccine adjuvants: Putting innate immunity to work. Immunity. 33(4):492–503. Desport M, Lewis J. 2010. Jembrana Disease Virus: Host Responses, Viral Dynamics and Disease Control. Current HIV Research. 8(1):53–65. Ditcham WGF, Lewis JR, Dobson RJ, Hartaningsih N, Wilcox GE, Desport M. 2009. Vaccination reduces the viral load and the risk of transmission of Jembrana disease virus in Bali cattle. Virology. 386(2):317–324. Gerdts V. 2015. Adjuvants for veterinary vaccines – types and modes of action. Berliner und Munchener Tierarztliche Wochenschrift. 128(11–12):456–463. Hartaningsih N, Dharma DM, Soeharsono S, Wilcox GE. 2001. The induction of a protective immunity against Jembrana disease in cattle by vaccination with inactivated tissue-derived virus antigens. Veterinary immunology and immunopathology. 78(2):163–176. Hatta H, Tsuda K, Akachi S, Kim M, Yamamoto T. 1993. Productivity and some properties of egg yolk antibody (IgY) against human rotavirus compared with rabbit IgG. Bioscience, biotechnology, and biochemistry. 57(3):450–454. Hodek P, Trefil P, Simunek J, Hudecek J, Stiborova M. 2013. Optimized protocol of chicken antibody (IgY) purification providing electrophoretically homogenous preparations. International Journal of Electrochemical Science. 8(1):113–124. Kertayadnya G, Wilcox GE, Soeharsono S, Hartaningsih N, Coelen RJ, Cook RD, Collins ME, Brownlie J. 1993. Characteristics of a retrovirus associated with Jembrana disease in Bali cattle. The Journal of general virology. 74 ( Pt 9):1765–1778. Larsson A, Balow R, Lindahl TL, Bålöw RM, Lindahl TL, Forsberg PO. 1993. Chicken antibodies: taking advantage of evolution--a review. Poultry science. 72(10):1807–1812. Pereira EPV, van Tilburg MF, Florean EOPT, Guedes MIF. 2019. Egg yolk antibodies (IgY) and their applications in human and veterinary health: A review. International Immunopharmacology. 73:293–303. Schade R, Calzado EG, Sarmiento R, Chacana PA, Porankiewicz-Asplund J, Terzolo HR. 2005. Chicken egg yolk antibodies (IgY-technology): A review of progress in production and use in research and human and veterinary medicine. ATLA Alternatives to Laboratory Animals. 33(2):129–154.doi:10.1177/026119290503300208. Schade R, Staak C, Hendriksen C, Erhard M, Hugl H, Koch G, Larsson A, Pollmann W, van Regenmortel M, Rijke E, et al. 1996. The Production of Avian (Egg Yolk) Antibodies: IgY. Alternatives to Laboratory Animals. 24(6):925–934. Soeharsono S, Hartaningsih N, Soetrisno M, Kertayadnya G, Wilcox GE. 1990. Studies of Experimental Jembrana Disease in Bali Cattle. I. Transmission and Persistence of the Infectious Agent in Ruminants and Pigs, and Resistance of Recovered cattle to Re-infection. Journal of Comparative Pathology. 103(1):49–59. Sun S, Mo W, Ji Y, Liu S. 2001. Preparation and mass spectrometric study of egg yolk antibody (Igy) against rabies virus. Rapid Communications in Mass Spectrometry. 15(9):708–712. Warr GW, Magor KE, Higgins DA. 1995. IgY: clues to the origins of modern antibodies. Immunology Today. 16(8):392–398. Wibawan IWT, Darmono IBP, Suartha IN. 2010. Variasi Respon Pembentukan IgY terhadap Toxoid Tetanus dalam Serum dan Kuning Telur pada Individu Ayam Petelur. Jurnal Veteriner. 11(3):152–157. Wibawan IWT, Kristanti ND, Zulfa A, Sasi KD, Permatasari DA, Cahyono MI, Julianto, Sibit G, Arnafia W. 2018. Production of IgY Against Infectious Bursal Disease Virus and Purification of IgY from Egg by Using Biocompatible Technique. International Journal of Applied Research in Veterinary Medicine. 16(3):175–179. Wilcox GE, Chadwick BJ, Kertayadnya G. 1995. Recent advances in the understanding of Jembrana Disease. Veterinary Microbiology. 46:249–255. Wilcox GE, Kertayadnya G, Hartaningsih N, Dharma DMM, Soeharsono S, Robertson T. 1992. Evidence for a viral aetiology of Jembrana disease in Bali cattle. Veterinary Microbiology. 33(1–4):367–374. Wood GW, Muskett JC, Hebert CN, Thornton DH. 1979. Standardization of the quantitative agar gel precipitin test for antibodies to infectious bursal disease. Journal of biological standardization. 7(2):89–96. Yokoyama H, Peralta RC, Horikoshi T, Hiraoka J, Ikemori Y, Kuroki M, Kodama Y. 1993. A Two-Step Procedure for Purification of Hen Egg Yolk Immunoglobulin G: Utilization of Hydroxypropylmethylcellulose Phthalate and Synthetic Affinity Ligand Gel (Avid AL®). Poultry Science. 72(2):275–281.

DOI: https://doi.org/10.22146/jsv.66613